發酵罐的滅菌方法

九章機械

一、濕熱滅菌法（最常用）

原理：利用高溫高壓蒸汽的穿透力和熱效應，使微生物蛋白質變性、酶失活，從而達到滅菌目的。
適用場景：適用于大多數發酵罐（如機械攪拌通風發酵罐、氣升式發酵罐）及液體培養基的滅菌。
操作步驟：

• 空罐滅菌（CIP清洗后）
  • 關閉所有閥門，向發酵罐內通入蒸汽，使罐內溫度升至 121-130℃，壓力維持在 0.1-0.15 MPa。
  • 保持該條件 20-30分鐘，確保罐體、管道、攪拌器等部件徹底滅菌。
  • 滅菌后，通過排汽閥緩慢釋放壓力，避免罐內負壓損壞設備。
    
• 實罐滅菌（培養基滅菌）
  • 進料：將配制好的培養基泵入發酵罐，注意避免泡沫產生。
  • 升溫：開啟蒸汽閥門，使培養基溫度升至 121℃，壓力 0.1 MPa 左右。
  • 保溫：維持溫度 121℃ 和壓力 0.1 MPa 持續 20-30分鐘（具體時間根據培養基體積和成分調整）。
  • 降溫：滅菌結束后，通過夾套通入冷卻水或循環冷卻液，快速降溫至發酵所需溫度（如30-37℃）。
  • 排汽：降溫過程中需間歇排汽，防止罐內形成負壓，同時避免蒸汽冷凝水稀釋培養基。
    
  
  

優點：滅菌徹底、成本低、操作簡便。
缺點：高溫可能破壞培養基中熱敏性成分（如維生素、氨基酸），需通過補料或優化配方解決。

二、干熱滅菌法

原理：利用高溫干燥空氣的氧化作用，使微生物脫水、蛋白質變性。
適用場景：適用于發酵罐內耐高溫但不宜用濕熱滅菌的部件（如玻璃器皿、金屬工具）。
操作步驟：

• 將待滅菌物品放入干熱滅菌箱，設置溫度 160-180℃，維持 2-3小時。
• 滅菌后，待箱內溫度降至 60℃ 以下再打開箱門，避免物品驟冷破裂。
  

優點：對熱敏性物質破壞小，適用于干燥物品。
缺點：滅菌時間長、能耗高，不適用于液體培養基或大型發酵罐。

三、過濾除菌法

原理：通過微孔濾膜（如0.22μm）截留微生物，實現無菌過濾。
適用場景：適用于熱敏性培養基成分（如血清、酶制劑）或空氣的滅菌。
操作步驟：

• 液體過濾：將培養基通過無菌濾膜（如聚醚砜膜）過濾至已滅菌的發酵罐中。
• 空氣過濾：在發酵罐進氣口安裝無菌空氣過濾器（如燒結金屬濾芯），過濾壓縮空氣中的微生物。
  

優點：避免高溫破壞熱敏性成分，適用于特定場景。
缺點：濾膜可能堵塞，需定期更換；無法殺滅濾膜表面的微生物，需配合其他滅菌方法使用。

路人甲

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咖啡續命

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咖啡續命

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