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標(biāo)題: 培養(yǎng)基的配制過(guò)程 [打印本頁(yè)]

作者: 海克斯儀器 時(shí)間: 2024-11-9 15:46
標(biāo)題: 培養(yǎng)基的配制過(guò)程
培養(yǎng)基是用于微生物、細(xì)胞或組織培養(yǎng)的液體或固體營(yíng)養(yǎng)溶液。不同的實(shí)驗(yàn)需求和微生物種類(lèi)需要不同成分的培養(yǎng)基。下面是一般培養(yǎng)基的配制過(guò)程，適用于大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。
1. 確定所需培養(yǎng)基類(lèi)型根據(jù)培養(yǎng)的目的和微生物類(lèi)型，首先確定培養(yǎng)基的類(lèi)型。常見(jiàn)的培養(yǎng)基有：

液體培養(yǎng)基（如 LB 培養(yǎng)基）
固體培養(yǎng)基（如瓊脂培養(yǎng)基）
選擇性培養(yǎng)基（如 MacConkey 培養(yǎng)基）
分化培養(yǎng)基（如 XLD 培養(yǎng)基）

2. 準(zhǔn)備所需原料確定培養(yǎng)基的配方，準(zhǔn)備所需的化學(xué)成分和原料，常見(jiàn)的成分包括：

氮源：如蛋白胨、酵母提取物、胰蛋白胨等。
碳源：如葡萄糖、蔗糖、甘露醇等。
無(wú)機(jī)鹽：如氯化鈉（NaCl）、硫酸鎂（MgSO?）、磷酸二氫鉀（KH?PO?）等。
氨基酸和維生素：根據(jù)需要添加。
瓊脂：用于固體培養(yǎng)基。
水：通常使用蒸餾水或去離子水。

3. 稱取原料根據(jù)配方要求，精確稱取各個(gè)成分的質(zhì)量。例如，若配制 1 L 培養(yǎng)基，按照配方上的比例計(jì)算并稱取。
4. 溶解培養(yǎng)基成分

將各個(gè)成分（如氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽等）溶解在一定量的蒸餾水或去離子水中。液體培養(yǎng)基可以將所有成分溶解在水中，而固體培養(yǎng)基需要加入瓊脂。
如果培養(yǎng)基中含有瓊脂，加入瓊脂粉末（通常為 15 g/L），并加熱至完全溶解。

5. 調(diào)節(jié) pH 值使用 pH 計(jì)測(cè)量溶液的 pH 值，并根據(jù)需要使用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)整 pH。不同微生物或細(xì)胞對(duì) pH 值有不同的要求，通常調(diào)整至適合的范圍，例如：

細(xì)菌培養(yǎng)：pH 通常在 7.0 左右。
真菌培養(yǎng)：pH 通常在 5.5 - 6.5 之間。

6. 滅菌

液體培養(yǎng)基：使用高壓蒸汽滅菌（121°C，15-20分鐘）來(lái)滅菌。通常通過(guò)高壓滅菌器（高壓鍋）進(jìn)行。
固體培養(yǎng)基：滅菌過(guò)程類(lèi)似，但需要注意不要過(guò)度加熱，以免瓊脂溶液蒸發(fā)或變質(zhì)。

7. 培養(yǎng)基冷卻與倒板

液體培養(yǎng)基：滅菌后，冷卻至室溫，可以直接裝瓶或分裝到小瓶中。
固體培養(yǎng)基：在瓊脂溶液冷卻至約 50-55°C 時(shí)，倒入培養(yǎng)皿中，形成固體培養(yǎng)基。此時(shí)需要避免空氣中的污染物進(jìn)入。

8. 儲(chǔ)存與使用

液體培養(yǎng)基：一般保存于冰箱中，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中，以防污染。
固體培養(yǎng)基：保存于室溫下，避免過(guò)熱或過(guò)濕。可在使用前保持適當(dāng)?shù)母稍飾l件。

注意事項(xiàng)：

無(wú)菌操作：整個(gè)培養(yǎng)基配制過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，特別是在添加液體成分、調(diào)節(jié) pH 和滅菌后操作時(shí)，應(yīng)確保使用無(wú)菌的工具和容器。
添加特殊成分：如果培養(yǎng)基需要添加抗生素、指示劑或其他特殊成分，這些通常在培養(yǎng)基滅菌后進(jìn)行，以防止高溫降解。

作者: 9549872675 時(shí)間: 2024-11-22 02:33
感謝樓主的精彩分享，讓我開(kāi)闊了視野。

作者: 神獸歸位 時(shí)間: 2024-11-22 09:48
你的回答很詳細(xì)，我很感激。

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